Søknad om om oppstart av Avl
Formål
Vi har nylig identifisert to sykdomsgivende aktiverende mutasjoner i reseptor tyrosin kinasen PDGFRB som årsak til to svært ulike sykdomsbilder, ocular pterygium-digital keloid dysplasia (OPDKD) og alvorlig Penttinen syndrom. Begge tilstandene er karakteriser med blindhet i ung alder forårsaket av alvorlig vascularisering av hornhinnen. Også andre har funnet aktiverende mutasjoner i PDGFRB assosiert med Kosaki overgrowth syndrome og infantil myofibromatose, de fleste av disse pasientene utvikler også øyesykdom. Pasientene er vanligvis født friske.
Funnet av aktiverende mutasjoner i PDGFRB åpner opp for presisjonsmedisin fordi det finnes en rekke medikamenter (reseptor tyrosin kinase inhibitorer) som hindrer slik aktivering. Vi utvikler øyedråper for å undersøke om topikal behandling med slike medikamenter kan forhindre utvikling av blindhet hos pasientene.
Det finnes transgene musemodeller for enkelte aktiverende mutasjoner i PDGFRB og disse har vist seg å utvikle sykdom som ligner på mennesker. Vi ønsker å opprette avl på en slik musemodell for å kartlegge sykdom, særlig øyesykdom, og undersøke hvorvidt denne kan egne seg som modell for utprøving av øyedråper.
Skadevirkninger
Musene er ikke publisert eller nøye kartlagt enda men fødes friske og utvikler sykdom fra de er et par måneder. Vi vil følge musene tett med tanke på sykdomsutvikling. Det er ikke forventet noen alvorlige skadevirkninger.
Forventet nytteverdi
Selv om aktiverende mutasjoner i PDGFRB er sjeldne (ca. 1/million) har disse alvorlig degenerative tilstandene store konsekvenser for individ, familie og samfunn. Økt kunnskap om sykdomsutvikling er viktig. Videre er det svært viktig å utvikle bedre behandling for disse tilstandene, særlig for barn som i dag foreløpig kun har lette sykdomsforandringer og bevart syn. Topikal behandling vil gi høy lokal konsentrasjon og få systemiske bivirkninger. I tillegg er PDGFRB også involvert i vanligere former for karinnvekst på hornhinnen, det er mulig også disse vil ha nytte av kunnskap og behandling.
Antall dyr og art
Vi har mottatt Sox2Cre mus med og uten PDGFRB mutasjon. Disse vil bli satt i avl med C57BL6 mus og forløst med keisersnitt. Avkom vil bli satt med rene C57BL6 mødre. Øreprøver vil bli tatt for genotyping.
Videre vil vi tilbakekrysse hver av linjene til C57BL6 bakgrunn
Hvordan etterleve 3R
Replacement: Vi har undersøkt og funnet effekt av medikament i cellekultur og undersøkt konsentrasjon, varighet og frekvens i denne modellen. Videre undersøkelse av effekt og bivirkninger må skje i en dyremodell og da må denne etableres.
Reduction: Vi vil ved avl genotype så raskt som mulig for å unngå unødige kull. Vi vil bruke et minimum av avlspar.
Refinement: Vi vil benytte rør for å plukke opp mus for undersøkelse. De vil ha tilgang til miljøberikelse i buret, som for eksempel hus, gnagepinner papir, flis o.l. De eneste prøvene som vil bli tatt av musene er øreprøver til genotyping. Dersom musene viser seg å utvikle sykdom som er til belastning vil de bli avlivet. Dersom musene er egnet vil vi (etter søknad) behandle dem med øyedråper for å forhindre sykdom. Avliving vil skje med CO2 eller med gass anestesi etterfulgt av transkardial perkusjon.
Vi har nylig identifisert to sykdomsgivende aktiverende mutasjoner i reseptor tyrosin kinasen PDGFRB som årsak til to svært ulike sykdomsbilder, ocular pterygium-digital keloid dysplasia (OPDKD) og alvorlig Penttinen syndrom. Begge tilstandene er karakteriser med blindhet i ung alder forårsaket av alvorlig vascularisering av hornhinnen. Også andre har funnet aktiverende mutasjoner i PDGFRB assosiert med Kosaki overgrowth syndrome og infantil myofibromatose, de fleste av disse pasientene utvikler også øyesykdom. Pasientene er vanligvis født friske.
Funnet av aktiverende mutasjoner i PDGFRB åpner opp for presisjonsmedisin fordi det finnes en rekke medikamenter (reseptor tyrosin kinase inhibitorer) som hindrer slik aktivering. Vi utvikler øyedråper for å undersøke om topikal behandling med slike medikamenter kan forhindre utvikling av blindhet hos pasientene.
Det finnes transgene musemodeller for enkelte aktiverende mutasjoner i PDGFRB og disse har vist seg å utvikle sykdom som ligner på mennesker. Vi ønsker å opprette avl på en slik musemodell for å kartlegge sykdom, særlig øyesykdom, og undersøke hvorvidt denne kan egne seg som modell for utprøving av øyedråper.
Skadevirkninger
Musene er ikke publisert eller nøye kartlagt enda men fødes friske og utvikler sykdom fra de er et par måneder. Vi vil følge musene tett med tanke på sykdomsutvikling. Det er ikke forventet noen alvorlige skadevirkninger.
Forventet nytteverdi
Selv om aktiverende mutasjoner i PDGFRB er sjeldne (ca. 1/million) har disse alvorlig degenerative tilstandene store konsekvenser for individ, familie og samfunn. Økt kunnskap om sykdomsutvikling er viktig. Videre er det svært viktig å utvikle bedre behandling for disse tilstandene, særlig for barn som i dag foreløpig kun har lette sykdomsforandringer og bevart syn. Topikal behandling vil gi høy lokal konsentrasjon og få systemiske bivirkninger. I tillegg er PDGFRB også involvert i vanligere former for karinnvekst på hornhinnen, det er mulig også disse vil ha nytte av kunnskap og behandling.
Antall dyr og art
Vi har mottatt Sox2Cre mus med og uten PDGFRB mutasjon. Disse vil bli satt i avl med C57BL6 mus og forløst med keisersnitt. Avkom vil bli satt med rene C57BL6 mødre. Øreprøver vil bli tatt for genotyping.
Videre vil vi tilbakekrysse hver av linjene til C57BL6 bakgrunn
Hvordan etterleve 3R
Replacement: Vi har undersøkt og funnet effekt av medikament i cellekultur og undersøkt konsentrasjon, varighet og frekvens i denne modellen. Videre undersøkelse av effekt og bivirkninger må skje i en dyremodell og da må denne etableres.
Reduction: Vi vil ved avl genotype så raskt som mulig for å unngå unødige kull. Vi vil bruke et minimum av avlspar.
Refinement: Vi vil benytte rør for å plukke opp mus for undersøkelse. De vil ha tilgang til miljøberikelse i buret, som for eksempel hus, gnagepinner papir, flis o.l. De eneste prøvene som vil bli tatt av musene er øreprøver til genotyping. Dersom musene viser seg å utvikle sykdom som er til belastning vil de bli avlivet. Dersom musene er egnet vil vi (etter søknad) behandle dem med øyedråper for å forhindre sykdom. Avliving vil skje med CO2 eller med gass anestesi etterfulgt av transkardial perkusjon.