Immunisering av transgene mus som modell av immunrespons forbundet med FNAIT
Lavt blodplatetall hos foster, føtal/neonatal alloimmun trombocytopeni (FNAIT), er en tilstand som forårsakes av at mor og foster bærer ulike varianter av et protein som befinner seg på overflaten av blant annet blodplater. Ved eksponering av fosterets proteinvariant i mors sirkulasjon, vil mors immunsystem kunne danne antistoffer mot fosterets proteinvariant. Denne responsen kalles alloimmunisering, og antistoffene kan så gå over i fosterets blodsirkulasjon hvor de binder til og fjerner fosterets blodplater. Siden hovedrollen til blodplater er å stoppe blødninger gjennom dannelsen av blodpropper, vil et lavt blodplatetall føre til økt risiko for blødninger hos fosteret. I alvorlige tilfeller av FNAIT kan dette føre til at fosteret får hjerneblødning, og i de mest ekstreme tilfellene permanent hjerneskade eller fosterdød. FNAIT er en sjelden tilstand som forekommer i ca. 1 av 1000 graviditeter, men til dags dato finnes ingen effektiv behandling eller profylakse mot FNAIT. Det er per i dag heller ingen etablert screening for å identifisere kvinner med immuniseringsrisiko.
Vi bruker her en FNAIT modell med mus som har blodplateantigen som likner det humane antigenet. Modellen baseres på immunisering som følge av eksponering av blodplater fra disse musene. Vi har lang erfaring med denne musemodellen fra tidligere opphold hos samarbeidspartnere i USA og via pågående fots 23182. Isolerte blodplater vil transfunderes til mus som uttrykker humane vevstypeantigener som er kjent for å fremvise dette humane blodplateantigenet til andre immunceller. Antistoffnivået i de immuniserte musene måles i laboratoriet. Videre i denne studien ønsker vi studere ulike sider ved patogenesen ved å gjøre både cellehøsting fra mus for å se på den underliggende immuncelleresponsen som driver antistoffproduksjonen, og kryssing av pre-immuniserte dyr med hanner med modifisert blodplateantigen for å studere effekten antistoffene har på museungene in vivo.
Studier har vist at de fleste kvinnene blir immunisert rundt tidspunktet for fødsel, og dette åpner for mulig forebygging av immunisering ved bruk av profylakse som kan redusere FNAIT relatert sykdom og mortalitet. Det er kjent fra andre immunresponser at immunisering kan forhindres gjennom antistoff-mediert immunsuppresjon, ved bruk av antistoffprofylakse. I denne studien vil vi i tillegg studere hvorvidt et monoklonalt antistoff kan benyttes som profylakse for å forhindre immunisering mot blodplateantigen i denne modellen.
Studier på patogenesen bak FNAIT og dokumentasjon på at profylaksen kan gi signifikant demping av immunresponsen, krever in vivo forsøk med mus da ingen in vitro studier kan erstatte den komplekse biologien til immunforsvaret. Oppsettene er satt opp med det minimum antall dyr beregnet for å få signifikante data, og er også basert på erfaring fra tidligere studier. Lett isofluran-anestesi er inkludert ved haleveneinjeksjoner for å redusere ubehag og stress for dyrene. Som miljøberikelse brukes hus/tunnel, redematerialet og gnagepinner i tre som standard ved AKM.
Dette er en studie vi har beregnet vil kreve inntil 596 mus, og forsøket klassifiseres som lett belastende. Det forventes ingen sykdomstegn hos immuniserte mus, men blødninger kan ses hos et fåtall av avkom fra immuniserte mus som forventet utfall av FNAIT tilstanden, og som vi ønsker å forhindre ved bruk av profylaksen.
Vi bruker her en FNAIT modell med mus som har blodplateantigen som likner det humane antigenet. Modellen baseres på immunisering som følge av eksponering av blodplater fra disse musene. Vi har lang erfaring med denne musemodellen fra tidligere opphold hos samarbeidspartnere i USA og via pågående fots 23182. Isolerte blodplater vil transfunderes til mus som uttrykker humane vevstypeantigener som er kjent for å fremvise dette humane blodplateantigenet til andre immunceller. Antistoffnivået i de immuniserte musene måles i laboratoriet. Videre i denne studien ønsker vi studere ulike sider ved patogenesen ved å gjøre både cellehøsting fra mus for å se på den underliggende immuncelleresponsen som driver antistoffproduksjonen, og kryssing av pre-immuniserte dyr med hanner med modifisert blodplateantigen for å studere effekten antistoffene har på museungene in vivo.
Studier har vist at de fleste kvinnene blir immunisert rundt tidspunktet for fødsel, og dette åpner for mulig forebygging av immunisering ved bruk av profylakse som kan redusere FNAIT relatert sykdom og mortalitet. Det er kjent fra andre immunresponser at immunisering kan forhindres gjennom antistoff-mediert immunsuppresjon, ved bruk av antistoffprofylakse. I denne studien vil vi i tillegg studere hvorvidt et monoklonalt antistoff kan benyttes som profylakse for å forhindre immunisering mot blodplateantigen i denne modellen.
Studier på patogenesen bak FNAIT og dokumentasjon på at profylaksen kan gi signifikant demping av immunresponsen, krever in vivo forsøk med mus da ingen in vitro studier kan erstatte den komplekse biologien til immunforsvaret. Oppsettene er satt opp med det minimum antall dyr beregnet for å få signifikante data, og er også basert på erfaring fra tidligere studier. Lett isofluran-anestesi er inkludert ved haleveneinjeksjoner for å redusere ubehag og stress for dyrene. Som miljøberikelse brukes hus/tunnel, redematerialet og gnagepinner i tre som standard ved AKM.
Dette er en studie vi har beregnet vil kreve inntil 596 mus, og forsøket klassifiseres som lett belastende. Det forventes ingen sykdomstegn hos immuniserte mus, men blødninger kan ses hos et fåtall av avkom fra immuniserte mus som forventet utfall av FNAIT tilstanden, og som vi ønsker å forhindre ved bruk av profylaksen.