Etablering av cecal ligation and puncture (CLP) modell i mus for studier med nye behandlinger for inflammatorisk–indusert sepsis
1 Formål: Pilot forsøk- in-house etablering og standardisering av CLP modell i mus for å undersøke nye behandlingsprinsipper med bruk av celleterapier for inflammatorisk-indusert sepsis. Målet er å samle nok data for etablering og standardisering av modellen slik at den kan benyttes i nye studier der vi ønsker å undersøke behandling av alvorlige vevsskader indusert av en bakteriell infeksjon.
2 Skadevirkninger: : Det er forventet belastende skadevirkninger. Vi setter opp worst case CLP modell i denne piloten. Postkirurgisk smerte vil forekomme det første døgnet etter kirurgi og smerter grunnet sepsis som utvikles vil være forventet. Dyrene vil bli sjekket hver 4 timer etter operasjon, og etter fastsatt scoreskjema vil dyr som oppnår en score 0-5 følges opp hver 2 time. Dyr som oppnår score 6 vil følges hver time Dette pilotforsøket vil vare maksimalt 48timer som ansees tilstrekkelig for å samle nok data for å etablere modellen.
3 Forventet nytteverdi: Alvorlig infeksjoner (bakteriell eller virus), som sepsis eller influenza, med organdysfunksjon er svært vanlig og årsak til eller medvirkende årsak til svært mange dødsfall i sykehus (20-25 %). Denne tilstanden forårsaker aktiverte blodceller og frigjøring av molekyler med proinflammatoriske egenskaper (sekundær betennelsesreaksjon). Det finnes ingen spesifikk behandling av den sekundære betennelsesreaksjonen. De fleste alvorlige tilstandene krever moderne intensivbehandling med respirator. Pasienter som lider av akutt lungesviktsyndrom behandles på overvåkings- eller intensivavdelinger og har en dødelighet opptil 70%. Det fins få legemidler tilgjengelig foruten steroider.
Pilotforsøket vil bidra til at vi kan etablere en god og robust CLP modell i mus. Modellen vil kunne benyttes som rasjonale for nye behandlingsalternativer og etablering av nye kliniske studier studier for denne problemstillingen.
4 Antall dyr og art: Totalt 112 mus; Disse fordeles likt mellom immunodeficient Rag 1 -/- og immunocompetence C57bl6 musestammer.
5 Hvordan etterleve 3R : Vi har satt opp gruppene med det laveste antall dyr som vil være nødvendig for å etablere en god CLP modell med objektive mål for vitenskapelige og humane endepunkter. Vi har ingen tidligere erfaring med CLP modellen hos mus, men har rådført oss med forskningsgrupper på OUS som tidligere har utført denne modellen. Vi har lang erfaring med kirurgiske prosedyrer i mus samt erfaring med med blodprøvetaking, infusjoner (i.v, i.p, s.c) og oral behandling slik at vi forventer minimalt stress ved håndtering av mus. Intensiv smertebehandling og oppfølging vil bli utført og dyrene vil rutinemessig tilbys oppblødt fôr og/eller recovery gel. Vi vil observere dyrenes generelle tegn til sepsis nøye som gir ubehag ved å se på markant strittende pels, nedsatt aktivitet, pukkel rygg, understilte bakben, nedsatt fôr inntak, kropsvekt, unnlatelse av å bevege seg ved berøring, inaktiv. Dette blir dokumentert ved hjelp av scoreskjema. Vi vil ta små blodprøver (30 ul) fire ganger per døgn for å undersøke utrykket og nivåer av inflammatoriske cytokiner (kinetikk for å definere endepunkter) for å karakterisere modellen.
2 Skadevirkninger: : Det er forventet belastende skadevirkninger. Vi setter opp worst case CLP modell i denne piloten. Postkirurgisk smerte vil forekomme det første døgnet etter kirurgi og smerter grunnet sepsis som utvikles vil være forventet. Dyrene vil bli sjekket hver 4 timer etter operasjon, og etter fastsatt scoreskjema vil dyr som oppnår en score 0-5 følges opp hver 2 time. Dyr som oppnår score 6 vil følges hver time Dette pilotforsøket vil vare maksimalt 48timer som ansees tilstrekkelig for å samle nok data for å etablere modellen.
3 Forventet nytteverdi: Alvorlig infeksjoner (bakteriell eller virus), som sepsis eller influenza, med organdysfunksjon er svært vanlig og årsak til eller medvirkende årsak til svært mange dødsfall i sykehus (20-25 %). Denne tilstanden forårsaker aktiverte blodceller og frigjøring av molekyler med proinflammatoriske egenskaper (sekundær betennelsesreaksjon). Det finnes ingen spesifikk behandling av den sekundære betennelsesreaksjonen. De fleste alvorlige tilstandene krever moderne intensivbehandling med respirator. Pasienter som lider av akutt lungesviktsyndrom behandles på overvåkings- eller intensivavdelinger og har en dødelighet opptil 70%. Det fins få legemidler tilgjengelig foruten steroider.
Pilotforsøket vil bidra til at vi kan etablere en god og robust CLP modell i mus. Modellen vil kunne benyttes som rasjonale for nye behandlingsalternativer og etablering av nye kliniske studier studier for denne problemstillingen.
4 Antall dyr og art: Totalt 112 mus; Disse fordeles likt mellom immunodeficient Rag 1 -/- og immunocompetence C57bl6 musestammer.
5 Hvordan etterleve 3R : Vi har satt opp gruppene med det laveste antall dyr som vil være nødvendig for å etablere en god CLP modell med objektive mål for vitenskapelige og humane endepunkter. Vi har ingen tidligere erfaring med CLP modellen hos mus, men har rådført oss med forskningsgrupper på OUS som tidligere har utført denne modellen. Vi har lang erfaring med kirurgiske prosedyrer i mus samt erfaring med med blodprøvetaking, infusjoner (i.v, i.p, s.c) og oral behandling slik at vi forventer minimalt stress ved håndtering av mus. Intensiv smertebehandling og oppfølging vil bli utført og dyrene vil rutinemessig tilbys oppblødt fôr og/eller recovery gel. Vi vil observere dyrenes generelle tegn til sepsis nøye som gir ubehag ved å se på markant strittende pels, nedsatt aktivitet, pukkel rygg, understilte bakben, nedsatt fôr inntak, kropsvekt, unnlatelse av å bevege seg ved berøring, inaktiv. Dette blir dokumentert ved hjelp av scoreskjema. Vi vil ta små blodprøver (30 ul) fire ganger per døgn for å undersøke utrykket og nivåer av inflammatoriske cytokiner (kinetikk for å definere endepunkter) for å karakterisere modellen.