ALKBH7s funksjon i mitokondrier og etter hypoksisk-iskemisk hjerneskade
E. coli AlkB er en demetylase som fjerner skader på DNA og RNA. ALKBH7 er en av ni mammalske AlkB homologer. Funksjonen og virkningsmekanismene til ALKBH7 er foreløpig uklare, men flere studier tyder på at proteinet spiller en rolle i programmert nekrose i celler eksponert for DNA-skadende agens. Videre viser en studie gjort på ALKBH7 knockout (KO) mus at proteinet muligens er involvert i fettmetabolisme og at adferden er endret sammenlignet med villtype (WT) mus. For å studere ALKBH7's rolle etter stress in vivo har vi brukt en modell for hypoksisk-iskemisk (HI) hjerneskade i mus. Resultater fra en pilotstudie tyder på at KO mus er mindre beskyttet mot HI hjerneskade enn WT mus. I dette prosjektet ønsker vi å kartlegge de underliggende mekanismene til ALKBH7 ifh til degenerering av neuronalt vev, metabolisme og adferd.
HI forsøkene vil være moderat belastende og består av et kirurgisk inngrep (< 5 min) etterfulgt av 1t i hypoksikammer, med påfølgende smerte (smertestillende vil bli gitt) og svekket allmenntilstand. De fleste musene blir avlivet innen 7 dager, mens de som skal brukes til å studere regenerering av vev blir avlivet 42 dager etter HI. Belastningen i de andre forsøkene vil være lett (veiing, fasting i 6t, sondeforing, blodprøver, matrasjonering, håndtering ved adferdsforsøk). Utover dette, analyseres organer og vev etter at musene er avlivet. Alle metodene er veletablerte og utføres av personer som har lang erfaring med metodene, noe som reduserer skadevirkningen til et minimum.
Mye tyder på at programmert nekrose bidrar til patogenesen til ulike sykdommer, inkludert iskemisk hjerneslag. Det å forstå mekanismene bak ALKBH7's rolle i programmert nekrose er derfor viktig med tanke på terapi. Mekanistisk forståelse vil også kunne åpne for mulighet for terapeutisk intervensjon av f.eks. kreftceller som er resistente mot apoptotisk celledød.
Vi søker om 440 mus.
Både modellen for HI i mus, de ulike adferdstestene og andre forsøk som er planlagt, er allerede veletablerte hos oss og er optimalisert slik at forventet belastningsgrad, med smertebehandling som angitt, vil være moderat og antall dyr som behøves er redusert til et minimum. Personer som skal utføre forsøkene har mange års erfaring med prosedyrene. For å redusere antall mus vil vi samle så mange relevante prøver som mulig fra ett og samme dyr og bruke samme dyr i flere forsøk, så langt det lar seg gjøre.
HI forsøkene vil være moderat belastende og består av et kirurgisk inngrep (< 5 min) etterfulgt av 1t i hypoksikammer, med påfølgende smerte (smertestillende vil bli gitt) og svekket allmenntilstand. De fleste musene blir avlivet innen 7 dager, mens de som skal brukes til å studere regenerering av vev blir avlivet 42 dager etter HI. Belastningen i de andre forsøkene vil være lett (veiing, fasting i 6t, sondeforing, blodprøver, matrasjonering, håndtering ved adferdsforsøk). Utover dette, analyseres organer og vev etter at musene er avlivet. Alle metodene er veletablerte og utføres av personer som har lang erfaring med metodene, noe som reduserer skadevirkningen til et minimum.
Mye tyder på at programmert nekrose bidrar til patogenesen til ulike sykdommer, inkludert iskemisk hjerneslag. Det å forstå mekanismene bak ALKBH7's rolle i programmert nekrose er derfor viktig med tanke på terapi. Mekanistisk forståelse vil også kunne åpne for mulighet for terapeutisk intervensjon av f.eks. kreftceller som er resistente mot apoptotisk celledød.
Vi søker om 440 mus.
Både modellen for HI i mus, de ulike adferdstestene og andre forsøk som er planlagt, er allerede veletablerte hos oss og er optimalisert slik at forventet belastningsgrad, med smertebehandling som angitt, vil være moderat og antall dyr som behøves er redusert til et minimum. Personer som skal utføre forsøkene har mange års erfaring med prosedyrene. For å redusere antall mus vil vi samle så mange relevante prøver som mulig fra ett og samme dyr og bruke samme dyr i flere forsøk, så langt det lar seg gjøre.