Role of tumor stromal fibroblasts in the overall response of NSCLC tumors to radiotherapy (copy)
Immunterapi er sterkt i vinden som terapeutisk alternativ ved behandlingsresistent kreft, og feltet har generert stor interesse hos kreftforskere og behandlere for å belyse de mange immunregulerende mekanismer som styrer immunresponsen ved kreftutvikling. I de senere årene har det blitt klart at elementer fra tumor mikromiljøet spiller en sentral rolle i den immunologiske kontrollen av kreftsvulster, og nye strategier er under utvikling for å eliminere disse immunologisk undertrykkende mekanismene fra tumor mikromiljøet.
Vårt prosjekt har som mål å avdekke immun-regulerende effekter utøvd av tumor-assosierte fibroblaster under tumorvekst, med langsiktig målsetting om å bruke denne kunnskapen til å øke effektiviteten av behandlingsstrategier som involverer immunterapi. I denne spesifikke studien har vi fokus på vekselvirkningen mellom tumor-assosierte fibroblaster (CAF-er) og såkalte «Natural Killer» (NK) immunceller.
I. FORMÅL: Studere immunregulerende funksjoner fra bestrålte og ubestrålte fibroblaster i mus.
II. SKADEVIRKNING på dyrene: Forsøk i kategori "Lett belastende", jmf, forsøksdyrforskriften, Del-III, pkt 1g. Forsøkene omfatter etablering av mono- og bilaterale tumorer i mus, med endepunkt ved diameter 10 mm for enkelttumorer, eller samlet tumordiameter 15 mm for bi-laterale tumorer, eller maksimalt 60 dager fra oppstalling.
III. NYTTEVERDI: I prekliniske studier som sikter på å øke responsraten av immunterapi mot kreft anvendes ofte to-tumorer-per-mus som modell. Resultater fra eksperimenter som skissert i vår søknad kan bli viktige for tolkning av denne type resultater, og kan bidra til design av mer hensiktsmessige dyremodeller for slike studier. Videre vil prosjektet også gi økt innsikt i fibroblasters rolle ved tumorutvikling og behandlingsrespons, og kan potensielt bidra til videre optimalisering av dagens kreftbehandling.
IV. ANTALL DYR: Studien omfatter totalt 128 dyr, fordelt på 5 piloter og 2 hoved-eksperimenter. DYREART: I tidligere forsøk har vi anvendt immunkomprimerte hunn-mus av typen BALB/c nude. Forsøkene som skisseres nå inkluderer bruk av samme musestamme som før, samt to forsøksgrupper i dyr som A) mangler immunceller av typen Natural Killer (NK) celler (CIEA BRG mouse), og B) vanlige Balb/c nude mus som får blokkert NK-celle funksjonen gjennom repeterte injiseringer av antiserum.
V. ETTERLEVELSE av 3R-er: 1) ERSTATNING: Vi har tidligere utført studier med cellekulturer som indikerer at fibroblaster regulerer tumor-respons på stråleterapi. Vi ønsker nå å videreføre disse resultatene, og vil teste hvordan fibroblasters immun-regulerende funksjoner påvirker tumorvekst in vivo. Vi trenger å gjøre våre eksperimenter på et komplekst fysiologisk system som gjenspeiler vekselvirkningene som faktisk skjer in vivo (i dyr). Disse forsøkene er det umulig å reprodusere i et in vitro system. 2) REDUKSJON: For å redusere påvirkning utenfra har vi forsøkt å la individene i hver gruppe være mest mulig like mht linje/stamme, kjønn og vekt. Dette bidrar til å minimalisere antall dyr. 3) RAFFINERING: A) Vi har i denne søknaden endret noe på prøveuttak fra tidligere piloter, slik at vi nå får mer data fra hvert dyr. Dette inkluderer blodprøvetaking fra hvert dyr rett før avliving. B) Den enkelte tumor vil være relativt liten, så vi trenger ikke å gjøre perfusjons-fiksering i denne forsøksserien.
Vårt prosjekt har som mål å avdekke immun-regulerende effekter utøvd av tumor-assosierte fibroblaster under tumorvekst, med langsiktig målsetting om å bruke denne kunnskapen til å øke effektiviteten av behandlingsstrategier som involverer immunterapi. I denne spesifikke studien har vi fokus på vekselvirkningen mellom tumor-assosierte fibroblaster (CAF-er) og såkalte «Natural Killer» (NK) immunceller.
I. FORMÅL: Studere immunregulerende funksjoner fra bestrålte og ubestrålte fibroblaster i mus.
II. SKADEVIRKNING på dyrene: Forsøk i kategori "Lett belastende", jmf, forsøksdyrforskriften, Del-III, pkt 1g. Forsøkene omfatter etablering av mono- og bilaterale tumorer i mus, med endepunkt ved diameter 10 mm for enkelttumorer, eller samlet tumordiameter 15 mm for bi-laterale tumorer, eller maksimalt 60 dager fra oppstalling.
III. NYTTEVERDI: I prekliniske studier som sikter på å øke responsraten av immunterapi mot kreft anvendes ofte to-tumorer-per-mus som modell. Resultater fra eksperimenter som skissert i vår søknad kan bli viktige for tolkning av denne type resultater, og kan bidra til design av mer hensiktsmessige dyremodeller for slike studier. Videre vil prosjektet også gi økt innsikt i fibroblasters rolle ved tumorutvikling og behandlingsrespons, og kan potensielt bidra til videre optimalisering av dagens kreftbehandling.
IV. ANTALL DYR: Studien omfatter totalt 128 dyr, fordelt på 5 piloter og 2 hoved-eksperimenter. DYREART: I tidligere forsøk har vi anvendt immunkomprimerte hunn-mus av typen BALB/c nude. Forsøkene som skisseres nå inkluderer bruk av samme musestamme som før, samt to forsøksgrupper i dyr som A) mangler immunceller av typen Natural Killer (NK) celler (CIEA BRG mouse), og B) vanlige Balb/c nude mus som får blokkert NK-celle funksjonen gjennom repeterte injiseringer av antiserum.
V. ETTERLEVELSE av 3R-er: 1) ERSTATNING: Vi har tidligere utført studier med cellekulturer som indikerer at fibroblaster regulerer tumor-respons på stråleterapi. Vi ønsker nå å videreføre disse resultatene, og vil teste hvordan fibroblasters immun-regulerende funksjoner påvirker tumorvekst in vivo. Vi trenger å gjøre våre eksperimenter på et komplekst fysiologisk system som gjenspeiler vekselvirkningene som faktisk skjer in vivo (i dyr). Disse forsøkene er det umulig å reprodusere i et in vitro system. 2) REDUKSJON: For å redusere påvirkning utenfra har vi forsøkt å la individene i hver gruppe være mest mulig like mht linje/stamme, kjønn og vekt. Dette bidrar til å minimalisere antall dyr. 3) RAFFINERING: A) Vi har i denne søknaden endret noe på prøveuttak fra tidligere piloter, slik at vi nå får mer data fra hvert dyr. Dette inkluderer blodprøvetaking fra hvert dyr rett før avliving. B) Den enkelte tumor vil være relativt liten, så vi trenger ikke å gjøre perfusjons-fiksering i denne forsøksserien.