DNA damage in Atlantic haddock. Method development for LC-MS/MS identification of DNA adducts in fish.
Dette forsøk er en vidreføring av prosjekt; FOTS ID 5924 "DNA damage and health effects in juvenile haddock exposed to sediment or produced water associated PAHs"
Formålet med det nye forsøk er at eksponere hyse for for ulike olje eller pyrolytiske relaterte polysykliske aromatiske hydrokarboner (PAH) for at fremskaffe et prøve material fra hyse som kan brukes til utvikling av nye analyse metoder (LC-MS/MS) for deteksjon og identifikasjon av DNA addukter i vild fisk.
Dette metode arbeide er meget viktig for at nå målet om at identifisere kilden til forurensninger som er ansvarlig for DNA-addukter som har blitt observert i vill hyse fanget rundt oljefeltene i Nordsjøen.
Baggrunden for behovet for utvikling av nye metoder er beskrevet i den nylig publiserte artikkel;
Pampanin, D.M., Brooks, S.J., Grøsvik, B.E., Le Goff, J., Meier, S., Sydnes, M.O. 2017. DNA adducts in marine fish as biological marker of genotoxicity in environmental monitoring: The way forward. Marine Environmental Research. (2017) 125: 49-62.
Det planlegges at eksponere voksen hyse for en rekke forskjellige PAHer enten som enkle komponenter eller i komplekse mixture. Fisken skal enten eksponeres via injeksjon i bukken (48 fisk) eller gjennom sondre-fôring (30 fisk). Der vil blive brukt en dose på 5 mg PAH/kg fisk. Dette er betydelig lavere end hvad som er kendt at være akutt giftig for fisk. Der forventes derfor ingen større skadevirkninger på fisken utover at fisken vil indusere detoksifiseringssystemet og dannelse av DNA addukter i lever og tarme.
Fisken vil blive eksponert for enten en enkel dose (injeksjon) eller 2 doser (sondre-fôring) og vil blive slagtet efter 3 dage (injeksjon) eller 7 dage (sondre-fôring). Der vil være 21 forskjellige behandlingsgrupper og der vil blive brukt 3 fisk i hver gruppe (et absolutt minimum for at kunne få et gjennomsnit mål for induksjonsgrad).
I 2014 blev der gjennomført et eksponeringsforsøk hvor juvenile hyse i to måneder bli eksponert gjennom mat for tre forskjellige PAH blandinger, en som inneholder lette PAH (2 rings), tungere PAH (3 og 4 rings) og meget tunge PAHer (4, 5 og 6 rings). Dette representerte eksponering enten for produsert vann, boreslam og pyrolytiske PAHer. Resultatene fra dette forsøk er publisert i «DNA damage and health effects in juvenile haddock exposed to sediment or produced water associated PAHs.» Rapport fra Havforskningsinstituttet Nr. 3-2017.
I dette forgående prosjekt så fant vi at kort eksponeringstid (3-7 dage) var nok for at indusere dannelsen av DNA addukter i hyse. Vi bruker denne nye kunnskab til at designe dette nye oppfølgningsforsøk.
Forsøket er finansiert av Statoil og det inngår i den nasjonale tilstandsovervågning som oljeselskabene er pålagt at gjennomføre av Miljødirektoratet.
Formålet med det nye forsøk er at eksponere hyse for for ulike olje eller pyrolytiske relaterte polysykliske aromatiske hydrokarboner (PAH) for at fremskaffe et prøve material fra hyse som kan brukes til utvikling av nye analyse metoder (LC-MS/MS) for deteksjon og identifikasjon av DNA addukter i vild fisk.
Dette metode arbeide er meget viktig for at nå målet om at identifisere kilden til forurensninger som er ansvarlig for DNA-addukter som har blitt observert i vill hyse fanget rundt oljefeltene i Nordsjøen.
Baggrunden for behovet for utvikling av nye metoder er beskrevet i den nylig publiserte artikkel;
Pampanin, D.M., Brooks, S.J., Grøsvik, B.E., Le Goff, J., Meier, S., Sydnes, M.O. 2017. DNA adducts in marine fish as biological marker of genotoxicity in environmental monitoring: The way forward. Marine Environmental Research. (2017) 125: 49-62.
Det planlegges at eksponere voksen hyse for en rekke forskjellige PAHer enten som enkle komponenter eller i komplekse mixture. Fisken skal enten eksponeres via injeksjon i bukken (48 fisk) eller gjennom sondre-fôring (30 fisk). Der vil blive brukt en dose på 5 mg PAH/kg fisk. Dette er betydelig lavere end hvad som er kendt at være akutt giftig for fisk. Der forventes derfor ingen større skadevirkninger på fisken utover at fisken vil indusere detoksifiseringssystemet og dannelse av DNA addukter i lever og tarme.
Fisken vil blive eksponert for enten en enkel dose (injeksjon) eller 2 doser (sondre-fôring) og vil blive slagtet efter 3 dage (injeksjon) eller 7 dage (sondre-fôring). Der vil være 21 forskjellige behandlingsgrupper og der vil blive brukt 3 fisk i hver gruppe (et absolutt minimum for at kunne få et gjennomsnit mål for induksjonsgrad).
I 2014 blev der gjennomført et eksponeringsforsøk hvor juvenile hyse i to måneder bli eksponert gjennom mat for tre forskjellige PAH blandinger, en som inneholder lette PAH (2 rings), tungere PAH (3 og 4 rings) og meget tunge PAHer (4, 5 og 6 rings). Dette representerte eksponering enten for produsert vann, boreslam og pyrolytiske PAHer. Resultatene fra dette forsøk er publisert i «DNA damage and health effects in juvenile haddock exposed to sediment or produced water associated PAHs.» Rapport fra Havforskningsinstituttet Nr. 3-2017.
I dette forgående prosjekt så fant vi at kort eksponeringstid (3-7 dage) var nok for at indusere dannelsen av DNA addukter i hyse. Vi bruker denne nye kunnskab til at designe dette nye oppfølgningsforsøk.
Forsøket er finansiert av Statoil og det inngår i den nasjonale tilstandsovervågning som oljeselskabene er pålagt at gjennomføre av Miljødirektoratet.