Systemtoksikologiske studier hos torsk
Forsøket inngår i prosjektet dCod 1.0: decoding systems toxicology of Atlantic cod (Gadus morhua), finansiert under Digitalt Liv-satsingen til NFR(BIOTEK2021). Formålet med forsøket er å generere en dypere forståelse av hvordan torsken responderer på ulike former for stress i miljøet på et systembiologisk nivå. En forventet nytteverdi i prosjektet er å generere nye verktøy for miljøovervåking og risikovurdering, samt generere kunnskap som har overføringsverdi til andre arter. I prosjektet er det sterkt fokus på3R-prinsippene. In vivo-forsøkene vil bygge på omfattende in vitro-forsøk med presisjonskuttete leverskiver (PCLS) fra torsk, en metode utviklet i vårt laboratorium (Eide et al., Aquatic Toxicology 2014), der dose- og tids-responser med enkeltstoffer vil bli studert. Dermed kan vi begrense in vivo-forsøkene til oppsett der vi validerer de mer komplekse responsene, samtidig som vi får kunnskap om systemiske responser og effekter som kan oppstå i andre organer, og i kombinasjon med andre typer stressfaktorer (f.eks.havforsuring). Det vil imidlertid være nødvendig å gjøre et antall eksponeringsforsøk med torsk in vivo, men der designet kan forenkles basert på in vitro-studiene, slik at færre torsk brukes i in vivo-studiene. Torsken vil bli eksponert for utvalgte sett av miljøgifter i ulike doser og kombinasjoner, vha ip injeksjon, tvangsforing (gavage) og/eller vannbåren eksponering. En poweranalyse indikerer et behov for 25 fisk pr gruppe, for å oppnå minst 8 fisk av hvert kjønn, noe somsamtidig gir stabile sosiale grupper. I hvert forsøksoppsett vil vi eksponere 6-10 grupper for ulike doser og kombinasjoner av stoffene, i inntil 4 uker. Lavdose-nivåene vil være noe høyere enn naturlig forekommende nivåer, mens høydose-nivåer vil ligge rundt realistisk forekommende nivåer i torsk fra kontaminerte fjorder. Totalt vil forsøket omfatte bruk av inntil 1000 torsk. Belastningsgraden til fiskene vil være mild til moderat ved de høyeste dosene. Ikke-dødelige endepunkt basert på genuttrykk, endringer i proteinmønster, metabolitter og fysiologiske responser vil bli målt.